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熔蠟儀在組織脫水浸蠟實驗中的使用方法

點擊次數:2195 發布時間:2018-03-14

熔蠟儀在組織脫水浸蠟實驗中的使用方法

 

    組織經過透明劑的完全透明后,被移放于使用熔蠟儀熔化后的65左右的石蠟中,于65的電熱恒溫箱中浸漬的過程稱為浸蠟。組織在脫水時,組織中的脂類和類脂等物質在脫水劑的作用下被溶解掉,留下了許多腔隙,許多管腔組織和血管,也有許多腔隙,這些都嚴重地影響了切片。組織浸蠟時,由于誘導劑(二甲苯)的作用,石蠟進入到組織的各個角落,并在各個角落中保存下來。當石蠟包埋后冷卻時,這浸入到里面的石蠟便可起到支撐的作用,而且使組織不致于變形,塌陷等現象,使切片能完整的切出,便于鏡下觀察。

 

    由于生物樣品各種組織成分不同,因此性質也各異,如軟硬程度,疏松、致密程度,面積大小等都不相同,自然狀態下要將它們切成十幾微米甚至幾個微米的薄片,幾乎是辦不到的。包埋(embedding)就是將某些特殊的支持物質浸入到組織塊內部,利用支持物質的物理特性,如由液態轉變成固態,使整個組織具有均勻一致的固態結構和足夠的硬度,以利于用切片機制取極薄的切片。利用石蠟(paraffin)作為包埋劑,將浸過蠟的組織塊置于石蠟內制成蠟塊,是組織學切片技術中zui常用的一種包埋方法。

 

    使用常規技術制作切片或超薄切片時,由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質浸透組織內部,整個組織一樣硬化,先將熔化的石蠟注入包埋托內(模具),而后用鑷子將經過浸蠟的組織塊從脫水盒中取出,放入包埋托中央,放在小冷臺上,用鑷子輕按組織塊,以達到組織塊平整,蓋上脫水盒底,再加好石蠟,移至冷凍臺上,待冷凍好后,卸下組織蠟塊待切。

    熔化石蠟時使用熔蠟儀操作更加方便,在熔蠟儀桶內放置蠟塊前應先關閉電源,固態蠟塊要切成小塊后放入,建議切成<50×50×50mm塊狀,過大的蠟塊會損壞桶內的保護網罩。根據放入石蠟的軟硬,設定恰當的溫度,石蠟有軟蠟和硬蠟之分,軟蠟的熔點有45、52~54。硬蠟的熔有56~58,58~60、60~62。使用過程中應隨時觀察,當桶內的蠟液低過桶體的1/3時,要及時加蠟。加熱使用時溫度波動會比較大,這屬正?,F象,當一段時間溫度恒定后即可正常使用。英格爾熔蠟儀在運行過程中應不定時的進行攪拌,可以提高精度均勻性。

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